基于TLR4/NF-κB通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2022.04.011

中华临床医师杂志(电子版) ›› 2022, Vol. 16 ›› Issue (04) : 349 -355. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2022.04.011

基础研究

基于TLR4/NF-κB通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果

刘志勇¹, 任德启²^,^†(

), 郭健², 赵彦青¹, 杨明辉², 李锋森², 成家宏²

^1. 450046　郑州，河南中医药大学第二临床医学院脑病科；450002　郑州，河南省中医院脑病科
^2. 450002　郑州，河南省中医院脑病科

收稿日期:2021-08-04 出版日期:2022-04-15
通信作者: 任德启
基金资助:
王松龄全国名老中医药专家工作室(国中医药人教发2018134号); 河南省中医药科学研究专项重点课题(20-21ZY1024); 河南省中医药拔尖人才培养项目(豫中医科教201835号); 河南省中医院中青年学术骨干（35-45）培育

Investigation of interventional effect of Yiqi Huoxue Qingre Jiedu recipe on atherosclerosis rats based on TLR4/NF-κB pathway

Zhiyong Liu¹, Deqi Ren²^,^†(), Jian Guo², Yanqing Zhao¹, Minghui Yang², Fengsen Li², Jiahong Cheng²

^1. Department of Encephalopathy, Henan University of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450046, China; Department of Encephalopathy, Henan Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450002, China
^2. Department of Encephalopathy, Henan Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450002, China

Received:2021-08-04 Published:2022-04-15
Corresponding author: Deqi Ren

全文 ( ) 下载PDF ( ) 导出引用

引用本文：

刘志勇, 任德启, 郭健, 赵彦青, 杨明辉, 李锋森, 成家宏. 基于TLR4/NF-κB通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2022, 16(04): 349-355.

Zhiyong Liu, Deqi Ren, Jian Guo, Yanqing Zhao, Minghui Yang, Fengsen Li, Jiahong Cheng. Investigation of interventional effect of Yiqi Huoxue Qingre Jiedu recipe on atherosclerosis rats based on TLR4/NF-κB pathway[J/OL]. Chinese Journal of Clinicians(Electronic Edition), 2022, 16(04): 349-355.

目的

研究基于Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）通路探究益气活血清热解毒方对动脉粥样硬化模型大鼠的干预效果。

方法

将60只大鼠随机分为正常组10只、其余50只大鼠建立动脉粥样硬化模型作为动脉粥样硬化组，喂养4周后每组随机抽样2只，取主动脉经HE染色光镜观察，以发现动脉粥样硬化斑块为建模成功，建模成功后将动脉粥样硬化组剩余48只大鼠分为模型组（9只）、辛伐他汀组（9只）、益气活血组（10只）、清热解毒组（10只）、益气活血清热解毒中药组（10只）5个亚组。建模成功后益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组分别给予药液9 ml/（kg·d）体重灌胃，辛伐他汀片组给予辛伐他汀药液5 ml/（kg·d）体重灌胃，正常组和模型组给予生理盐水9 ml/（kg·d），以上各组均连续灌胃8周。对比分析各组的血脂指标甘油三脂（TG）、血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、超敏C反应蛋白（Hs-CRP）、白介素-6（IL-6）水平及TLR4/NF-κB通路蛋白表达量。

结果

与正常组相比，模型组、辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平升高，HDL-C水平降低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；与模型组相比，辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组、益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平降低，HDL-C水平升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）；与辛伐他汀组、益气活血组、清热解毒组相比，益气活血清热解毒中药组TG、TC、LDL-C、Hs-CRP、IL-6水平降低，HDL-C水平升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。与模型组相比，益气活血清热解毒中药组TLR4、NF-κB表达量降低（P=0.001）。

结论

益气活血清热解毒方可起到调节动脉粥样硬化大鼠血脂、缓解炎症症状的作用，其机制可能与抑制TLR4/NF-κB通路有关。

关键词: TLR4/NF-κB通路, 益气活血清热解毒方, 动脉粥样硬化, 干预效果

Objective

To explore the interventional effect of Yiqi Huoxue Qingre Jiedu (Qi-tonifying, blood circulation-activating, heat-clearing, and detoxification) recipe on atherosclerosis rats based on the TLR4/NF-κB pathway.

Methods

Sixty rats were randomly divided into either a normal group (10 rats) or an atherosclerosis group (50 rats; atherosclerosis was induced). After feeding for 4 weeks, two rats were randomly selected from each group, and the aorta was dissected and observed under a light microscope after HE staining to find atherosclerotic plaque. After successful modeling, the remaining 48 rats in the atherosclerosis group were divided into five groups: model group (9 rats), simvastatin group (9 rats), Qi-tonifying and blood circulation-activating group (10 rats), heat-clearing and detoxification group (10 rats), and Qi-tonifying, blood circulation-activating, heat-clearing, and detoxification group (10 rats). The Qi-tonifying and blood circulation-activating group, the heat-clearing and detoxification group, and the Qi-activating, blood circulation-activating, heat-clearing, and detoxification group were given the corresponding traditional Chinese medicine recipes at 9 ml/kg/d body weight, respectively; the simvastatin tablet group was given 5 mg/(kg·d) body weight of simvastatin solution, and the normal group and the model group were given 9 ml/kg/d of normal saline. All the treatments were given intragastrically for 8 consecutive weeks. The levels of TG, TC, LDL-C, HDL-C, hs-CRP, and IL-6 and the protein expression of TLR4 and NF-κB in different groups were compared and analyzed.

Results

Compared with the normal group, the levels of TG, TC, LDL-C, hs-CRP, and IL-6 were significantly increased in the model group, simvastatin group, Qi-tonifying and blood circulation-activating group, heat-clearing and detoxification group, and Qi-tonifying, blood circulation-activating, heat-clearing, and detoxification groups, while the level of HDL-C was significantly decreased (P＜0.05). Compared with the model group, the levels of TG, TC, LDL-C, hs-CRP, and IL-6 were significantly decreased in the simvastatin group, Qi-tonifying and blood circulation-activating group, heat-clearing and detoxification group, and Qi-tonifying, blood circulation-activating, heat-clearing, and detoxification group, while the level of HDL-C was significantly increased (P＜0.05). Compared with the simvastatin group, Qi-tonifying and blood circulation-activating group, and heat-clearing and detoxification group, the levels of TG, TC, LDL-C, hs-CRP, and IL-6 in the Qi-tonifying, blood circulation-activating,, heat-clearing, and detoxification group were significantly decreased, while the level of HDL-C was significantly increased (P＜0.05). Compared with the model group, the protein expression of TLR4 and NF-κB was significantly reduced in the Qi-tonifying, blood circulation-activating,, heat-clearing, and detoxification group (P=0.001).

Conclusion

Yiqi Huoxue Qingre Jiedu recipe can regulate blood lipids and relieve inflammatory symptoms in atherosclerotic rats via mechanisms that may be related to the inhibition of the TLR4/NF-κB pathway.

Key words: TLR4/NF-κB pathway, Yiqi Huoxue Qingre Jiedu recipe, Atherosclerosis, Interventional effect

图1 光镜下病理切片对照（HE染色，×200）。图a为正常大鼠组；图b为动脉粥样硬化大鼠组注：黑色箭头为脂质、钙盐、泡沫细胞

图2 病理特征比较（HE染色，×200）。图a为正常组；图b为模型组；图c为辛伐他汀组；图d为益气活血组；图e为清热解毒组；图f为益气活血清热解毒中药组注：黑色箭头为脂质、钙盐、泡沫细胞

表1 各组血脂指标表达水平比较（

x ˉ

±s）

组别	例数	TG（mmol/L）	TC（mmol/L）	HDL-C（mmol/L）	LDL-C（mmol/L）
正常组	8	0.65±0.06	1.09±0.17	2.79±0.20	0.29±0.08
模型组	9	1.93±0.16^a	3.25±0.30^a	1.04±0.10^a	1.32±0.10^a
辛伐他汀组	9	1.34±0.11^ab	2.65±0.27^ab	1.63±0.13^ab	0.88±0.08^ab
益气活血组	10	1.33±0.09^ab	2.55±0.19^ab	1.67±0.18^ab	0.86±0.07^ab
清热解毒组	10	1.32±0.10^ab	2.54±0.17^ab	1.69±0.16^ab	0.85±0.08^ab
益气活血清热解毒中药组	10	0.86±0.07^abc	1.40±0.12^abc	2.21±0.22^abc	0.51±0.05^abc
F值		10.091	6.806	8.673	10.727
P值		＜0.001	＜0.001	＜0.001	＜0.001

表1 各组血脂指标表达水平比较（

x ˉ

±s）

组别	例数	TG（mmol/L）	TC（mmol/L）	HDL-C（mmol/L）	LDL-C（mmol/L）
正常组	8	0.65±0.06	1.09±0.17	2.79±0.20	0.29±0.08
模型组	9	1.93±0.16^a	3.25±0.30^a	1.04±0.10^a	1.32±0.10^a
辛伐他汀组	9	1.34±0.11^ab	2.65±0.27^ab	1.63±0.13^ab	0.88±0.08^ab
益气活血组	10	1.33±0.09^ab	2.55±0.19^ab	1.67±0.18^ab	0.86±0.07^ab
清热解毒组	10	1.32±0.10^ab	2.54±0.17^ab	1.69±0.16^ab	0.85±0.08^ab
益气活血清热解毒中药组	10	0.86±0.07^abc	1.40±0.12^abc	2.21±0.22^abc	0.51±0.05^abc
F值		10.091	6.806	8.673	10.727
P值		＜0.001	＜0.001	＜0.001	＜0.001

表2 各组Hs-CRP、IL-6水平比较（

x ˉ

±s）

组别	例数	Hs-CRP（ng/L）	IL-6（ng/L）
正常组	8	80.51±8.12	35.98±3.55
模型组	9	170.45±17.11^a	74.24±7.26^a
辛伐他汀组	9	150.44±15.02^ab	60.25±6.35^ab
益气活血组	10	149.99±15.21^ab	60.11±6.44^ab
清热解毒组	10	149.50±14.98^ab	60.08±6.35^ab
益气活血清热解毒中药组	10	95.41±9.58^abc	42.36±4.02^abc
F值		5.253	5.279
P值		＜0.001	＜0.001

表2 各组Hs-CRP、IL-6水平比较（

x ˉ

±s）

组别	例数	Hs-CRP（ng/L）	IL-6（ng/L）
正常组	8	80.51±8.12	35.98±3.55
模型组	9	170.45±17.11^a	74.24±7.26^a
辛伐他汀组	9	150.44±15.02^ab	60.25±6.35^ab
益气活血组	10	149.99±15.21^ab	60.11±6.44^ab
清热解毒组	10	149.50±14.98^ab	60.08±6.35^ab
益气活血清热解毒中药组	10	95.41±9.58^abc	42.36±4.02^abc
F值		5.253	5.279
P值		＜0.001	＜0.001

表3 各组主动脉组织TLR4/NF-κB通路蛋白表达量对比（

x ˉ

±s）

组别	例数	TLR4	NF-κB
正常组	8	0.61±0.08	0.59±0.05
模型组	9	1.78±0.16^a	1.84±0.17^a
辛伐他汀组	9	1.22±0.11^ab	1.31±0.13^ab
益气活血组	10	1.21±0.10^ab	1.30±0.14^ab
清热解毒组	10	1.19±0.09^ab	1.29±0.12^ab
益气活血清热解毒中药组	10	0.85±0.07^abc	0.79±0.08^abc
F值		10.182	9.231
P值		＜0.001	＜0.001

表3 各组主动脉组织TLR4/NF-κB通路蛋白表达量对比（

x ˉ

±s）

组别	例数	TLR4	NF-κB
正常组	8	0.61±0.08	0.59±0.05
模型组	9	1.78±0.16^a	1.84±0.17^a
辛伐他汀组	9	1.22±0.11^ab	1.31±0.13^ab
益气活血组	10	1.21±0.10^ab	1.30±0.14^ab
清热解毒组	10	1.19±0.09^ab	1.29±0.12^ab
益气活血清热解毒中药组	10	0.85±0.07^abc	0.79±0.08^abc
F值		10.182	9.231
P值		＜0.001	＜0.001

图3 动脉组织TLR4/NF-κB通路蛋白WB图注：TLR4为Toll样受体4；NF-κB为核因子κB；GAPDH为甘油醛-3-磷酸脱氢酶；WB为蛋白质印迹法

1	Yuan T, Yang T, Chen H, et al. New insights into oxidative stress and inflammation during diabetes mellitus-accelerated atherosclerosis [J]. Redox Biol, 2019, 20: 247-260.
2	代长良, 田野. 巨噬细胞在动脉粥样硬化及血管炎症中作用的研究进展 [J]. 心血管康复医学杂志, 2021, 30(1): 75-78.
3	Ruscica M, Zimetti F, Adorni MP, et al. Pharmacological aspects of ANGPTL3 and ANGPTL4 inhibitors: new therapeutic approaches for the treatment of atherogenic dyslipidemia [J]. Pharmacol Res, 2020, 153: 104653.
4	王铭扬, 仲爱芹, 熊鑫, 等. 补肾抗衰片对动脉粥样硬化模型血管周围脂肪炎症的实验研究 [J]. 天津中医药, 2020, 37(6): 693-697.
5	郑国学, 谭强, 郑江华, 等. 红细胞微粒与动脉粥样硬化相关性研究进展 [J]. 实用临床医药杂志, 2021, 25(6): 113-117, 132.
6	胡彦武, 杨温欣, 包小雪, 等. 葛根素改善动脉粥样硬化大鼠血脂异常及炎症反应的作用机制 [J]. 医药导报, 2021, 40(2): 175-179.
7	Niu N, Xu S, Xu Y, et al. Targeting mechanosensitive transcription factors in atherosclerosis [J]. Trends Pharmacol Sci, 2019, 40(4): 253-266.
8	Peng W, Cai G, Xia Y, et al. Mitochondrial dysfunction in atherosclerosis [J]. DNA Cell Biol, 2019, 38(7): 597-606.
9	康秉涛, 郭蒙, 孙晓莹, 等. 白藜芦醇抗动脉粥样硬化研究进展 [J]. 陕西医学杂志, 2020, 49(11): 1527-1530.
10	张彦栋, 杨艳敏, 徐美玲, 等. 代谢性炎症与动脉粥样硬化及中医药防治策略 [J]. 现代中西医结合杂志, 2021, 30(14): 1581-1586.
11	宋强, 褚耀南, 张海龙, 等. 益气活血清热解毒汤治疗冠心病血运重建术后心绞痛(卒心痛)的效果 [J]. 中华中医药学刊, 2019, 37(7): 1706-1709.
12	曹晋, 祝海毅, 陈勇, 等. 益气活血解毒方治疗急性冠脉综合征介入术后气虚痰浊、瘀毒互结证患者的临床研究 [J]. 中国中医急症, 2021, 30(1): 63-66.
13	Lai YC, Woollard KJ, McClelland RL, et al. The association of plasma lipids with white blood cell counts: results from the multi-ethnic study of atherosclerosis [J]. J Clin Lipidol, 2019, 13(5): 812-820.
14	张克连, 郭静宜, 戴若竹. 虾青素对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的降脂、抗氧化和抗炎作用研究 [J]. 中国免疫学杂志, 2020, 36(7): 794-798.
15	郭杨志, 杜娟, 姜敏, 等. 益气化痰活血方对动脉粥样硬化小鼠主动脉p-NF-κB(p65)、p-IκB表达的影响 [J]. 环球中医药, 2021, 14(2): 188-192.
16	刘洋, 孙岳, 杨安宁, 等. 铁死亡参与高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化及ox-LDL诱导的泡沫细胞形成过程 [J]. 实用医学杂志, 2021, 37(5): 585-590.
17	聂忠富, 孙小燕, 张太平, 等. 吴茱萸碱抑制动脉粥样硬化大鼠氧化应激和炎症反应的实验研究 [J]. 西部中医药, 2019, 32(8): 12-15.
18	晏子俊, 张良明, 徐关丽, 等. 依折麦布联合氟伐他汀对动脉粥样硬化性脑梗死患者血脂四项及Apo-B、hs-CRP水平的影响 [J]. 中国医药导刊, 2019, 21(11): 669-673.
19	张立新, 刘晓丽, 聂晓博, 等. 丹参多酚酸盐对动脉粥样硬化大鼠TLR4/IL-6/STAT3通路的影响 [J]. 上海中医药大学学报, 2020, 34(4): 61-65.
20	章维志, 李国莺, 祁芹, 等. 地奥心血康对动脉粥样硬化大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的调节作用 [J]. 中国中药杂志, 2020, 45(3): 602-608.
21	梁浩, 于莹, 邹天雨, 等. 双黄连对动脉粥样硬化大鼠TLR4/MyD88/NF-κB信号通路表达的影响实验研究 [J]. 现代中药研究与实践, 2020, 34(1): 20-23, 63.

[1]	马晓菊, 梁潇, 段云友, 袁丽君, 赵萍. NB_AV脂质纳泡对ApoE ^-/-小鼠动脉粥样硬化病变的评估和干预[J/OL]. 中华医学超声杂志（电子版）, 2024, 21(06): 608-616.
[2]	马艳波, 华扬, 刘桂梅, 孟秀峰, 崔立平. 中青年人颈动脉粥样硬化病变的相关危险因素分析[J/OL]. 中华医学超声杂志（电子版）, 2023, 20(08): 822-826.
[3]	汤峥丽, 王芳, 王唯坚. 中老年人群幽门螺杆菌感染对非酒精性脂肪肝及冠状动脉粥样硬化影响的关联性分析[J/OL]. 中华消化病与影像杂志(电子版), 2024, 14(02): 137-140.
[4]	石佳娜, 钱琳艳, 姬凯悦, 祁金文, 胡情, 孙佳斌. 从PVAT 白色脂肪棕色化角度探讨中药在防治动脉粥样硬化中的应用[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(09): 853-858.
[5]	温绍敏, 王雅晳, 施依璐, 段莎莎, 云书荣, 张小杉. 靶向超声造影技术在动脉粥样硬化治疗中的应用进展[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(05): 496-499.
[6]	麻凌峰, 张小杉, 施依璐, 段莎莎, 魏颖, 夏士林, 张敏洁, 王雅皙. 纳米泡载药靶向治疗动脉粥样硬化的研究进展[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2024, 18(02): 214-218.
[7]	张洪, 王宏宇. 神经酰胺与心脏和血管疾病关系的研究进展[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2023, 17(11): 1202-1205.
[8]	王林源, 熊鑫, 杨坤, 邓勇志. 基于冠状动脉CT血管成像的影像组学列线图鉴别诊断易损斑块的价值[J/OL]. 中华诊断学电子杂志, 2024, 12(01): 1-8.
[9]	肖韩艳, 王子杰, 王岳, 李岩. 槲皮素通过抑制小鼠骨髓来源泡沫细胞焦亡抗动脉粥样硬化的研究[J/OL]. 中华卫生应急电子杂志, 2024, 10(01): 26-32.
[10]	吴晓明, 翟仰魁, 王娟, 张硕, 许杰, 潘从清. 男性2 型糖尿病患者空腹C 肽和定量胰岛素敏感性检测指数与血浆致动脉粥样硬化指数的相关性[J/OL]. 中华肥胖与代谢病电子杂志, 2024, 10(04): 288-294.
[11]	唐欣, 翟文海, 王润婷, 周胜宇, 靳航. 补体在缺血性卒中疾病中的研究进展[J/OL]. 中华脑血管病杂志(电子版), 2024, 18(04): 382-392.
[12]	陈绚, 欧宁江, 叶洁梅, 邓瑾倩. 纤维蛋白原β链启动因子基因多态性与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关联性研究[J/OL]. 中华脑血管病杂志(电子版), 2024, 18(01): 33-39.
[13]	曾德阳, 董贺千禧, 陶凉, 肖红艳, 曾燕, 鄢华. 中年心血管危险因素增加阿尔茨海默病相关痴呆的流行病学和机制研究进展[J/OL]. 中华脑血管病杂志(电子版), 2024, 18(01): 6-13.
[14]	刘英, 马利军, 王宝军, 刘晓林, 柴圣婷, 苏宁. 颅内动脉粥样硬化斑块成分及特征与缺血性脑卒中相关性的HRMR-VWI研究[J/OL]. 中华脑血管病杂志(电子版), 2023, 17(06): 549-556.
[15]	辛伽伦, 袁兴运, 刘志勤, 师瑞, 蒋锋, 刘锋昌, 李伟旺, 张恒, 郭强, 何剑波, 姚力. 药物洗脱支架在急性大脑中动脉粥样硬化闭塞性卒中患者急诊血管成形术中的临床疗效[J/OL]. 中华脑血管病杂志(电子版), 2023, 17(06): 539-544.

阅读次数

全文

摘要

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Investigation of interventional effect of Yiqi Huoxue Qingre Jiedu recipe on atherosclerosis rats based on TLR4/NF-κB pathway

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Investigation of interventional effect of Yiqi Huoxue Qingre Jiedu recipe on atherosclerosis rats based on TLR4/NF-κB pathway